Estudios inmunológicos en la pareja donante/receptor para trasplante de células progenitoras hematopoyéticas

Se analizaron los resultados de los estudios inmunol√≥gicos pretrasplante¬† (tipificaci√≥n de ant√≠genos HLA de donantes y receptores relacionados y determinaci√≥n de anticuerpos anti-HLA clase I y clase II en los ¬†receptores), para trasplante de c√©lulas progenitoras hematopoy√©ticas, en el per√≠odo de enero a diciembre de 2013 en el Centro de Ingenier√≠a Celular y Trasplante de √ďrganos y Tejidos (CICEL) del Instituto de Hematolog√≠a e Inmunolog√≠a. La tipificaci√≥n molecular HLA de los loci A, B, DR y DQ se realiz√≥ con el kit de Olerup SSP HLA A B DR DQ SSP¬† combi tray de baja resoluci√≥n. Para determinar la presencia de anticuerpos anti-HLA se emple√≥ la t√©cnica inmunoezim√°tica (ELISA), Kit LIFECODES QuikScreen y LIFECODES B-Screen anti-HLA clase I y II. ¬†Las leucemias agudas constituyeron los diagn√≥sticos m√°s frecuentes para la solicitud del estudio. El¬† 45,6 % de todos los posibles donantes resultaron haploid√©nticos con su receptor; el 21 % totalmente incompatibles y el 33,3 % id√©nticos. Con relaci√≥n al polimorfismo HLA en la poblaci√≥n de estudio, para la clase I, locus A: los ant√≠genos A*02 y A*24 resultaron los m√°s frecuentes en la totalidad de los individuos; para el locus B, en individuos blancos prevalecieron los ant√≠genos B*35 y B*44; y en no blancos, B*35 y B*18. Para los ant√≠genos clase II, locus DRB1, fueron frecuentes ¬†los ant√≠genos DRB1*03 y DRB1*04 en individuos blancos; en los no blancos, acompa√Īando al DRB1*03 ¬†estuvo el DRB1*15;¬† para ¬†el locus DQB1, los ant√≠genos ¬†DQB1*03 y DQB1*05 fueron frecuentes para blancos y DQB1*06 para los no blancos. Las mayores incompatibilidades se presentaron en los loci B y DRB1. La¬† poblaci√≥n evaluada mostr√≥ elevada presencia de anticuerpos anti HLA, 44 % para clase I y 72 % para clase II.

Odalis M de la Guardia Pe√Īa, Mar√≠a de los Angeles Garc√≠a Garc√≠a, Catalino R Ustariz Garc√≠a, Luz M Morera Barrios
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Método cubano para determinar el porcentaje calculado de anticuerpos reactivos contra panel
Arturo Chang Monteagudo, Lelyem Marcell Rodríguez, Catalino R Ustariz García, Antonio Bencomo Hernández
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Polimorfismo de los antígenos leucocitarios humanos en receptores cubanos de trasplante relacionado de progenitores hematopoyéticas

Introducción: El trasplante relacionado de células progenitoras hematopoyéticas (TCPH) es una alternativa terapéutica curativa para los pacientes con ciertos tipos de hemopatías o de inmunodeficiencias, en la que se selecciona como donante a un familiar del receptor. Objetivo: Caracterizar el sistema de antígenos leucocitarios humanos (HLA) en receptores de TCPH relacionado. Métodos: Se realizó un estudio descriptivo y transversal en el departamento de Histocompatibilidad del Instituto de Hematología e Inmunología desde enero 2013 hasta diciembre de 2015. Se tipificaron 75 genes HLA mediante la técnica de reacción en cadena de la polimerasa con cebadores de secuencia específico, de baja resolución a 117 pacientes con criterio de TCPH. Para el análisis inmunogenético se empleó el programa Arlequín 3.5.2.2. Resultados: Fueron más frecuentes los genes HLA-A*02, HLA-B*35, HLA-DQB1*03, HLA-DRB1*03 y HLA-DRB1*04, los haplotipos de dos loci HLA-A*02 B*35, HLA-DQB1*03 DRB1*04 y el haplotipo extendido HLA-A*03 B*07 DQB1*06 DRB1*15. Conclusiones: Los genes del sistema HLA en pacientes cubanos candidatos a TCPH relacionado presentaron frecuencias similares a las descritas en poblaciones generales de Cuba y el mundo, aunque con características distintivas en algunos genes y haplotipos.

Jes√ļs Salim Bur√≥n Hern√°ndez, Odalis M de la Guardia Pe√Īa, Arturo Chang Monteagudo, Luz M Morera Barrios, Mar√≠a de los √Āngeles Garc√≠a Garc√≠a, Catalino Ustariz Garc√≥a
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Optimizaci√≥n de la extracci√≥n de √Ācido Desoxirribonucleico para la tipificaci√≥n molecular de los Ant√≠genos Leucocitarios Humanos

Para la tipificaci√≥n de los Ant√≠genos Leucocitarios Humanos (HLA), por Reacci√≥n en Cadena de la Polimerasa (PCR), utilizando el m√©todo de Cebador Espec√≠fico de Secuencia (SSP), se necesitan entre 3 y 6 ¬Ķg de √Ācido Desoxirribonucleico (ADN) de elevada pureza. Se realiz√≥ un estudio en el Centro de Ingenier√≠a Celular y Trasplante de √ďrganos y Tejidos de la Habana, Cuba, para determinar las condiciones y las muestras √≥ptimas. El ADN se extrajo de muestras frescas y almacenadas en congelaci√≥n de sangre total y capa leucocitaria, as√≠ como de sangre coagulada y plasma de 15 voluntarios; y de una suspensi√≥n de linfocitos. Se utiliz√≥ un extractor ‚ÄúQIAcube‚ÄĚ y el sistema ‚ÄúQIAamp DNA Blood Mini‚ÄĚ. La concentraci√≥n y pureza del ADN se determin√≥ mediante un espectrofot√≥metro de microgotas ‚ÄúEPOCH‚ÄĚ con software ‚ÄúGen 5‚ÄĚ. A partir de 200 ¬ĶL de sangre total y de capa leucocitaria se obtuvieron como promedio 5,8 y 22,4 ¬†¬Ķg de ADN respectivamente, sobrepas√°ndose siempre los 3 ¬Ķg. El 100% de las muestras de plasma y el 6,6% de sangre coagulada proporcionaron menos de 3 ¬Ķg. De una suspensi√≥n de 30 x 106¬† linfocitos y se extrajeron 40 ¬Ķg. El radio A260/A280 estuvo siempre entre 1,7 y 2. La sangre total y la capa leucocitaria, tanto frescas como congeladas rindieron en todos los casos una cantidad √≥ptima de ADN, no as√≠ el plasma y la sangre coagulada. La mayor cantidad de ADN se extrajo de una suspensi√≥n de linfocitos. Todos los eluatos tuvieron adecuada pureza independientemente del tipo de muestra.

Arturo Chang Monteagudo, Luz Mirella Morera Barrio, Catalino Ronal Ustariz García, Antonio Bencomo Hernández
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