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Supervivencia de pacientes con linfoma no-Hodgkin y s√≠ntomas neurol√≥gicos seg√ļn inmunofenotipo del l√≠quido cefalorraqu√≠deo

Introducción: Los linfomas no-Hodgkin pueden infiltrar el sistema nervioso central y producir síntomas neurológicos, lo cual incrementa la mortalidad. El diagnóstico de esta infiltración se puede realizar mediante el estudio del líquido cefalorraquídeo por la técnica de citometría de flujo, con una mayor sensibilidad que la citología convencional.

Objetivo: Estimar la supervivencia global de pacientes con Linfoma no-Hodgkin y s√≠ntomas neurol√≥gicos seg√ļn el inmunofenotipo celular del l√≠quido cefalorraqu√≠deo.

M√©todos: Se realiz√≥ un estudio anal√≠tico y prospectivo en 15 pacientes con diagn√≥stico confirmado de linfoma no-Hodgkin y s√≠ntomas neurol√≥gicos, con citolog√≠a negativa del l√≠quido cefalorraqu√≠deo, tratados en el servicio de oncolog√≠a del Instituto Nacional de Oncolog√≠a y Radiobiolog√≠a, durante los a√Īos 2017 y 2018. El inmunofenotipo fue caracterizado mediante citometr√≠a de flujo multiparam√©trica.

Resultados: El 60.0 % de los pacientes fue del sexo femenino y el 53.4 % mayor de 60 a√Īos. Hubo una mortalidad del 26.7 %. Se realizaron 17 inmunofenotipos, el 58.9 % fue normal, el 23.4 % reactivo y el 17.7 % sospechoso de malignidad. La supervivencia global fue mayor en pacientes con l√≠quido cefalorraqu√≠deo con inmunofenotipo normal (HR. 0.04).

Conclusiones: La  citometría de flujo pudo discriminar células sospechosas de malignidad, en pacientes cuyas citologías fueron negativas. La presencia en el líquido cefalorraquídeo de células atípicas, de pleocitosis y de un índice de linfocito-monocito alto se asoció con una supervivencia global menor.

Carlos Agustín Villegas Valverde, Anamary Suárez Reyes, Griselda Torres López, Tamara González Madruga, Lázara Yinet Martínez Espinosa, Elías Antonio Gracia Medina, María del Carmen Arango Prado
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Expresión del antígeno CD45 en la Leucemia Linfoide aguda Pediátrica

Introducción: La leucemia linfoide aguda (LLA) es la neoplasia más frecuente en la infancia. La determinación del antígeno CD45 discrimina entre los blastos y las células reactivas en la médula ósea (MO).
Objetivo: Evaluar la expresi√≥n del ant√≠geno CD45 sobre los blastos de pacientes con LLA, seg√ļn los distintos subtipos inmunol√≥gicos, su posible relaci√≥n con las caracter√≠sticas biol√≥gicas y cl√≠nicas de presentaci√≥n de la enfermedad y la respuesta al tratamiento antileuc√©mico.
Método: Se estudiaron 150 pacientes con LLA procedentes de varios servicios oncohematológicos del país, entre enero del 2008 y mayo del 2015. El inmunofenotipaje celular de la MO se realizó por citometría de flujo.
Resultados: El ant√≠geno CD45 mostr√≥ una gran heterogeneidad de expresi√≥n sobre los linfoblastos. Del total de enfermos estudiados, 19,3 % no expresaron sobre los blastos el ant√≠geno CD45, 36,7 % presentaron una expresi√≥n moderada y 44 % mostraron una alta densidad de expresi√≥n. Se encontr√≥ diferencia significativa al comparar el fenotipo leuc√©mico con la expresi√≥n del ant√≠geno CD45 sobre los blastos (p = 0,000). Ning√ļn enfermo present√≥ adenopat√≠as mediastinales, con diferencias significativas (p = 0,000), seg√ļn el fenotipo y la expresi√≥n de CD45. Los pacientes con LLA-T cuyos blastos no expresaron CD45 tuvieron una mala respuesta al tratamiento anti-leuc√©mico los d√≠as 8 y 15 en sangre perif√©rica y MO, respectivamente.
Conclusi√≥n: La expresi√≥n de CD45 sobre los blastos, pudiera ser considerada como un factor pron√≥stico adicional para la estratificaci√≥n en diferentes grupos de riesgos, de la LLA en el ni√Īo.

Vianed Marsán Suárez, Consuelo Macías Abraham, Gabriela Díaz Domínguez, Yaimara Morales Garrido, Rosa María Lam Díaz, Sergio Machín García, Alejandro González Otero, Raquel Fernández Nodarse, Tamara Cedré Hernández, César Valdés Sojo
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Correlación entre morfología y citometría de flujo en la Leucemia Linfoide Aguda infantil

Introducción: La leucemia linfoide aguda (LLA) constituye del 75 al 80 % del total de leucemias agudas (LA) en la edad pediátrica.
O
bjetivo: Establecer la correspondencia entre los criterios morfol√≥gicos e inmunol√≥gicos por citometr√≠a de flujo (CMF), en un grupo de ni√Īos con diagn√≥stico de LA y pancitopenia grave.
Métodos:
se realiz√≥ un estudio en ni√Īos con LA procedentes de varios servicios oncohematol√≥gicos del pa√≠s, entre enero de 2008 y mayo de 2015. El inmunofenotipaje celular de la m√©dula √≥sea se realiz√≥ por CMF.
Resultados:
Del total de enfermos, 150 fueron LLA por CMF. En 111 (74 %) pacientes se diagnostic√≥ LLA de fenotipo B y en 39 (26 %) LLA de fenotipo T. En 122 enfermos (81,3 %) hubo correspondencia entre la morfolog√≠a linfoide de los blastos y el diagn√≥stico de LLA por CMF. En 28 pacientes no se encontr√≥ correspondencia entre el diagn√≥stico morfol√≥gico e inmunol√≥gico. En 26 de estos ni√Īos, la morfolog√≠a no identific√≥ el linaje celular leuc√©mico y el diagn√≥stico de LLA se realiz√≥ exclusivamente por la CMF. En un paciente, donde la morfolog√≠a de los blastos mostr√≥ caracter√≠sticas de precursores mieloides, la CMF evidenci√≥ la expresi√≥n de ant√≠genos inmaduros de la l√≠nea linfoide y se concluy√≥ como una LLA pro-B. En un paciente con pancitopenia grave, diagnostic√≥ una LLA pre-T por CMF.
Conclusiones:
Estos resultados demuestran que la CMF es una técnica altamente sensible y específica, no solo para definir el linaje celular leucémico sino, además, para identificar aquellos subtipos de LLA de difícil diagnóstico morfológico,  lo que permite la instauración del tratamiento antileucémico específico.

Vianed Marsán Suárez, Lázaro O del Valle Pérez, Gabriela Díaz Domínguez, Consuelo Macías Abraham, Sergio Machin García, Rosa María Lam Díaz, Orestes Chaguez Leyva, César Valdés Sojo, Martha B García Caraballoso, María Josefa Plá del Toro
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Vianed Marsán Suárez, Lázaro O. del Valle Pérez, Gabriela Díaz Domínguez, Consuelo Macías Abraham
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Lina Maria Martinez Sanchez, Laura Isabel Jaramillo Jaramillo, Luis Felipe √Ālvarez Hern√°ndez, Felipe Hern√°ndez Restrepo, Camilo Ruiz Mej√≠a, Juan Diego Villegas √Ālzate
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Hemoglobinuria parox√≠stica nocturna: de StrŌčbing al Eculizumab

RESUMEN

La hemoglobinuria parox√≠stica nocturna (HPN) es un trastorno clonal severo, raro, no maligno y adquirido de la c√©lula madre hematopoy√©tica. ¬†¬†Es el √ļnico trastorno hemol√≠tico adquirido causado por una anomal√≠a de la membrana eritrocitaria como resultado de una mutaci√≥n som√°tica clonal de un gen, ¬†el¬† fosfatidilinositol glucano clase A (PIG-A), situado en el brazo corto del cromosoma X. ¬†Se han identificado una serie de prote√≠nas reguladoras del complemento, entre las que se destacan ¬†el factor acelerador de la degradaci√≥n (CD55) y el factor inhibidor de la lisis reactiva de la membrana (CD 59), deficientes en esta enfermedad. ¬†La HPN se clasifica en cl√°sica,¬† asociada a otro trastorno medular y en subcl√≠nica. ¬†Su diagn√≥stico se apoya en estudios hematol√≥gicos, bioqu√≠micos, pruebas serol√≥gicas especiales, estudios eritroferrocin√©ticos e imagenol√≥gicos. ¬†La electroforesis de alta resoluci√≥n de prote√≠nas de membrana y la citometr√≠a de flujo multiparam√©trica constituyen t√©cnicas¬† de elecci√≥n para el diagn√≥stico. ¬†El tratamiento de la anemia, de los episodios tromb√≥ticos y de las infecciones constituyen los pilares terap√©uticos b√°sicos. ¬†Dentro de los agentes farmacol√≥gicos m√°s utilizados se destacan: los esteroides, los andr√≥genos, la eritropoyetina recombinante humana y el factor estimulador de colonias granuloc√≠ticas. Recientemente, el anticuerpo monoclonal eculizumab ha aumentado la expectativa de vida de estos pacientes con una mejor√≠a de su calidad de vida.


Ivis Macías Pérez, Tania García Peralta, Teresa Fundora Delgado, Norma Fernández Delgado
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Correlación entre morfología y citometría de flujo en la leucemia linfoide aguda infantil
Israel Parra-Ortega, Margarita Martínez Arias, Briceida López Martínez
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NORMALIZACI√ďN DE UN INMUNOENSAYO PARA LA DETECCI√ďN DE ANTICUERPOS ANTIPLAQUETARIOS POR CITOMETR√ćA DE FLUJO
Y Adams-Villalón
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ESTUDIO DE LAS SUBPOBLACIONES LINFOCITARIAS POR CITOMETR√ćA DE FLUJO EN UN PER√ćODO DE CUATRO A√ĎOS
A S√°nchez-Ballester
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CORRELACI√ďN ENTRE MORFOLOG√ćA Y CITOMETR√ćA DE FLUJO EN LA LEUCEMIA AGUDA DE DEBUT
V Mars√°n Su√°rez
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DIAGN√ďSTICO POR CITOMETR√ćA DE FLUJO DE LA HEMOGLOBINURIA PAROX√ćSTICA NOCTURNA
G Díaz Domínguez
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Obtención de una versión IgG1 de ratón del rituximab para detectar la molécula CD20 humana

I

Introducción: El rituximab, anticuerpo quimérico que reconoce la molécula CD20 humana, se ha utilizado en el tratamiento de diversos trastornos linfoproliferativos de células B. Para la selección de los potenciales beneficiarios del tratamiento con rituximab se han desarrollado técnicas que, mediante el uso de anticuerpos monoclonales, detectan la presencia del CD20 en los linfocitos de estos pacientes.

Objetivo: Obtener y caracterizar un anticuerpo recombinante IgG1 de ratón específico para la molécula CD20 humana, que contenga las regiones variables del anticuerpo rituximab.

M√©todos: Para la expresi√≥n estable del anticuerpo recombinante se emple√≥ la transducci√≥n lentiviral de c√©lulas de embri√≥n de ri√Ī√≥n humano (HEK293). La caracterizaci√≥n inmunoqu√≠mica del anticuerpo se realiz√≥ por la t√©cnica de Western Blot y su capacidad de reconocimiento de la mol√©cula CD20 humana se evalu√≥ por citometr√≠a de flujo e inmunohistoqu√≠mica.

Resultados: Se obtuvo el anticuerpo 1F5 que reconoce, por citometría de flujo, la molécula CD20 en líneas celulares humanas de origen linfoide, así como en células de sangre periférica de humanos sanos y pacientes con trstornos linfoproliferativos de células B. Sin embargo, la técnica de inmunohistoquímica solo permitió detectar con este anticuerpo la molécula CD20 en tejidos frescos, no así en los embebidos en parafina. Conclusiones: Este trabajo sugiere las potencialidades del uso del anticuerpo 1F5 para las mediciones de la expresión de CD20 por citometría de flujo en pacientes con leucemias B o linfomas B avanzados en fase de leucemización. Esto complementaría los estudios para la selección apropiada de pacientes para el tratamiento con el rituximab.

Osmany Harteman √Āvila, Ana Victoria Casadesus Pazos, Cristina Mar√≠a Mateo de Acosta del R√≠o, Alejandro L√≥pez - Requena, Katya Sosa Aguiar, Denise Dorvignit Pedroso, Teresita Rodr√≠guez Obaya, Mercedes Cede√Īo Arias, Tays Hern√°ndez Garc√≠a
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IMPORTANCIA DEL ESTUDIO INMUNOL√ďGICO PARA EL DIAGN√ďSTICO Y TRATAMIENTO DE LAS LEUCEMIAS AGUDAS
MB García Caraballoso
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Diagnóstico por citometría de flujo de la hemoglobinuria paroxística nocturna.

Introducci√≥n: La hemoglobinuria parox√≠stica (HPN) nocturna es una enfermedad clonal, adquirida y no maligna de la c√©lula madre hematopoy√©tica. En este padecimiento se encuentra afectado el anclaje a la membrana celular de mol√©culas como el CD55 y CD59, fundamentales en la regulaci√≥n de la lisis mediada por el complemento. Por su elevada especificidad y sensibilidad, la citometr√≠a de flujo ¬†multiparam√©trica (CFM) es el m√©todo de elecci√≥n para el diagn√≥stico de esta enfermedad. Objetivo: Establecer un algoritmo diagn√≥stico de la HPN por CMF. Material y M√©todo: Se analiz√≥ una muestra de sangre perif√©rica para CFM de un paciente con sospecha de HPN. El inmunofenotipaje celular se realiz√≥ con un panel de anticuerpos monoclonales dirigidos contra los ant√≠genos que se expresan en la membrana citoplasm√°tica mediante su anclaje al glicosilfosfatidilinositol. Las muestras se leyeron en un cit√≥metro GALLIOS, Beckman Coulter y los datos obtenidos se analizaron con el empleo del programa inform√°tico Kaluza. Resultados: Se identificaron cuatro clones HPN. En los granulocitos se observ√≥ un clon HPN de aproximadamente 90 %, con deficiencia en la expresi√≥n de CD16, CD24, CD55 y CD59. En los monocitos se observaron dos clones: (1) clon CD14_CD59_ y (2) clon CD14_CD59+ con tama√Īos clonales de 59,77 % y 19,45 %, respectivamente. En los eritrocitos se identific√≥ un clon de 19,98 % y de determin√≥ el grado de afectaci√≥n. Conclusiones: El algoritmo de an√°lisis propuesto permite identificar las poblaciones celulares con clones HPN. Adem√°s, dichos clones pueden ser cuantificados en cuanto a tama√Īo clonal y expresividad de los ant√≠genos dependientes de anclaje a glicosilfosfatidilinositol. Con la CFM se logra determinar con elevada sensibilidad el grado de afectaci√≥n de los eritrocitos en la expresi√≥n de CD59 como medida directa de la susceptibilidad que experimentan a la lisis por el complemento.

Gabriela Díaz Domínguez, Vianed Marsán suárez, Amanda Sánchez Ballester
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La citometría de flujo en el estudio de las citopenias inmunes
Gilberto Soler Noda
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Utilidad del cariotipo y la citometr√≠a de flujo en el mieloma m√ļltiple

Introducci√≥n.El mieloma m√ļltiple tiene una incidencia aproximada de 3.5 a 6 casos por 100 000 personas por a√Īo; es la segunda neoplasia hematol√≥gica m√°s com√ļn y representa m√°s del 10% de los casos de malignidades hematol√≥gicas.Objetivo. Revisar los principales patrones gen√©ticos del mieloma m√ļltiple a trav√©s de la citometr√≠a de flujo multiparam√©trica y cariotipo, ¬†resaltando sus ventajas y desventajas. M√©todos.Se realiz√≥ una revisi√≥n bibliogr√°fica exhaustiva desde septiembre de 2017 hasta marzo de 2018 en bases de datos como Medline, ScienceDirect, Lilacs y Embase, en ingl√©s y espa√Īol, con los t√©rminos MeSH de b√ļsqueda: mieloma m√ļltiple, citometr√≠a de flujo, cariotipo, gen√©tica, diagn√≥stico. Resultados.A pesar de que existen otros m√©todos diagn√≥sticos empleados en el mieloma m√ļltiple, la citometr√≠a de flujo multiparam√©trica y el cariotipo siguen siendo los m√°s utilizados. Conclusi√≥n. La citometr√≠a de flujo multiparam√©trica es un pilar en la inmunofenotipificaci√≥n y el monitoreo de las neoplasias hematol√≥gicas, junto con la cl√≠nica del paciente, los resultados paracl√≠nicos y la evaluaci√≥n morfol√≥gica de la sangre, adem√°s de ser parte de la valoraci√≥n inicial por la capacidad de aportar resultados concluyentes en poco tiempo.

Lina Maria Martinez Sanchez, Luis Felipe √Ālvarez Hern√°nde, Camilo Ruiz Mej√≠a, Juan Diego Villegas √Ālzate
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Caracterización biológica del marcador CD66c y su importancia clínica en la leucemia linfoide aguda

Las leucemias son un grupo heterog√©neo de hemopat√≠as con diversa etiolog√≠a, patogenia, historia natural y pron√≥stico en las que se desencadena una proliferaci√≥n clonal. La leucemia linfobl√°stica aguda (LLA) es el tipo de c√°ncer m√°s com√ļn en los ni√Īos, se caracteriza por la infiltraci√≥n de c√©lulas neopl√°sicas del sistema hematopoy√©tico a la m√©dula √≥sea, sangre y otros tejidos. Fue considerada fatal hasta hace 30 a√Īos, hoy, la tasa de sobrevida a los 5 a√Īos supera el 70%, lo que implica que la mayor√≠a de los pacientes puede curarse; sin embargo, la situaci√≥n es diferente para la poblaci√≥n infantil de los pa√≠ses en desarrollo. Se estima que la supervivencia al c√°ncer es entre 10 y 20% menor que para los infantes en pa√≠ses desarrollados. Uno de los marcadores de inmunofenotipo que ha cobrado mayor relevancia en los √ļltimos a√Īos en el diagn√≥stico de LLA-B y seguimiento de la enfermedad m√≠nima residual es el CD66c, este es una glicoprote√≠na miembro de la familia del ant√≠geno carcinoembrionario con funci√≥n de adhesi√≥n celular y ampliamente utilizado como marcador tumoral que fue descubierto por SvenBerg a finales de los a√Īos 1970. ¬†Este ant√≠geno se expresa en la superficie de los granulocitos y est√° implicado en varias funcionesbiol√≥gicas, que incluyen la adhesi√≥n celular, la migraci√≥n, la transducci√≥n de se√Īales y la regulaci√≥n de la expresi√≥n g√©nica. Este ant√≠geno se presenta frecuentemente en varios tipos de c√°ncer y su sobrexpresi√≥n se asocia a menudo con pobre respuesta al tratamiento y disminuci√≥n de la supervivencia de los pacientes. Diversos estudios evidencian que este marcador se relaciona con la presencia de diversas alteraciones cromos√≥micas como BCR-ABL, CRLF2,hiperdiploid√≠a, que permiten orientar al pron√≥stico de la enfermedad.

Shirley Gigiola Cruz Rubio, Adriana Lancheros, Yusselfy M√°rquez Benitez, Mabely Mosquera Heredia, Julieth Oliveros Barros
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Elementos 1 - 17 de 17

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