Anticuerpos anticitomegalovirus y antivirus de Epstein Barr en pacientes cubanos en espera de trasplante hematopoyético

Las complicaciones secundarias a las infecciones por citomegalovirus (CMV) y virus de Epstein Barr (EBV) constituyen las principales causas de morbilidad y mortalidad por infecciones en los pacientes que reciben injertos de células progenitoras hematopoyéticas (CPH). La detección de anticuerpos específicos contra cada uno de estos virus en el periodo pretrasplante permite prevenir la primoinfección durante la inmunosupresión terapéutica.La investigación tuvo como objetivo determinar la seroprevalencia de anticuerpos anti-CMV y anti-EBV e identificar aquellos pacientes con riesgo de adquirir una infección primaria postrasplante.Se realizó la detección de anticuerpos IgM e IgG anti-CMV y anti-EBV por ELISA, a 110 pacientescon indicación de pruebas de histocompatibilidad para trasplante de CPH, entre enero del 2013 y enero del 2016, en el Departamento de Histocompatibilidad del Instituto de Hematología e Inmunología de La Habana.La seroprevalencia de anticuerpos anti-CMV en la población estudiada fue del 84,5% y anti-EBV, del 90,9%. Los menores de 9 años presentaron un porcentaje de positivad del 70,6 y 64,7% para IgG anti-CMV y EBV respectivamente, encontrándose un incremento de la seroprevalencia con la edad.La seroprevalenciade anticuerpos anti-CMV y anti-EBV en los pacientes en espera de trasplante de CPH en Cuba es semejante a otras poblaciones; lo que sugiere la necesidad evitar el contagio por transmisión a los casos seronegativos.

Delfina Costales Elizaldes, Luz Morera Barrios, Nadezhda González García, Arturo Chang Monteagudo, Lelyem Marcell Rodríguez, Catalino R Ustariz García, Antonio Bencomo Hernández
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Ausencia de asociación HLA-A*68 - enfermedad renal crónica, en pacientes del occidente y centro de Cuba

La enfermedad renal crónica es un problema de salud a nivel mundial que frecuentemente evoluciona a la insuficiencia renal crónica terminal (IRC),  que requiere el tratamiento de remplazo por métodos dialíticos o de trasplante renal. En un estudio reciente se evidenció la elevada frecuencia del gen HLA-A*68 en pacientes con IRC, lo que contrasta con los resultados de caracterizaciones HLA en la población cubana reportados con anterioridad. Se realizó un estudio retrospectivo para determinar la posible asociación del gen HLA-A*68 con la IRC. Se analizaron las tipificaciones previas de 410 pacientes en diálisis, del occidente y centro de Cuba, y de 322 controles que incluían donantes de células progenitoras hematopoyéticas y donantes cadáveres de órganos sólidos, de las mismas regiones. La tipificación HLA se realizó con el estuche de baja resolución Olerup SSP® HLA-A-B-DR-DQ SSP (Olerup, Alemania). Las frecuencias alélicas se estimaron por algoritmo EM mediante el programa Arlequín 3.5, y para la comparación de la frecuencia de genes entre grupos se utilizó la prueba de Χ2 con corrección de Yates, calculado en el programa Statistical 8.0. La frecuencia de expresión del gen HLA-A*68 fue de 0,060 en los pacientes con IRC y de 0,051 en los controles, sin diferencias estadísticamente significativas entre grupos (p = 0,590). Los presentes resultados no permiten establecer asociación entre el HLA-A*68 y la propensión a padecer IRC en los pacientes del occidente y centro de Cuba.

Arturo Chang Monteagudo, Tania García Olivera, Luz M Morera Barrios, Melquis Fernández Leliebre, Enrique Rodríguez Díaz, Nialis Caraballo Rivera, Antonio Bencomo Hernández
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Optimización de la extracción de Ácido Desoxirribonucleico para la tipificación molecular de los Antígenos Leucocitarios Humanos

Para la tipificación de los Antígenos Leucocitarios Humanos (HLA), por Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR), utilizando el método de Cebador Específico de Secuencia (SSP), se necesitan entre 3 y 6 µg de Ácido Desoxirribonucleico (ADN) de elevada pureza. Se realizó un estudio en el Centro de Ingeniería Celular y Trasplante de Órganos y Tejidos de la Habana, Cuba, para determinar las condiciones y las muestras óptimas. El ADN se extrajo de muestras frescas y almacenadas en congelación de sangre total y capa leucocitaria, así como de sangre coagulada y plasma de 15 voluntarios; y de una suspensión de linfocitos. Se utilizó un extractor “QIAcube” y el sistema “QIAamp DNA Blood Mini”. La concentración y pureza del ADN se determinó mediante un espectrofotómetro de microgotas “EPOCH” con software “Gen 5”. A partir de 200 µL de sangre total y de capa leucocitaria se obtuvieron como promedio 5,8 y 22,4  µg de ADN respectivamente, sobrepasándose siempre los 3 µg. El 100% de las muestras de plasma y el 6,6% de sangre coagulada proporcionaron menos de 3 µg. De una suspensión de 30 x 106  linfocitos y se extrajeron 40 µg. El radio A260/A280 estuvo siempre entre 1,7 y 2. La sangre total y la capa leucocitaria, tanto frescas como congeladas rindieron en todos los casos una cantidad óptima de ADN, no así el plasma y la sangre coagulada. La mayor cantidad de ADN se extrajo de una suspensión de linfocitos. Todos los eluatos tuvieron adecuada pureza independientemente del tipo de muestra.

Arturo Chang Monteagudo, Luz Mirella Morera Barrio, Catalino Ronal Ustariz García, Antonio Bencomo Hernández
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